顯微鏡的放大率和分辨率之間的區(qū)別

　　了解熒光成像時要獲得良好結(jié)果時，了解放大倍率和分辨率之間的區(qū)別非常重要。當談論放大倍數(shù)時，我們指的是在顯微鏡下觀察物體時會出現(xiàn)多大的物體。相反，當我們從實際意義上談論分辨率時，我們指的是我們可以在圖像中區(qū)分多少細節(jié)，這可能是主觀的。從技術(shù)上講，分辨率受光的折射特性限制。

　　使用熒光可以提高分辨率

　　分辨率和放大率不一樣。在顯微鏡下，我們將放大圖像中可見的細節(jié)稱為分辨率。如果您看不到放大后的樣本中的細節(jié)，則放大或使某些內(nèi)容看起來變大不會有什么好處。明視野顯微鏡依賴于由于樣品各個部分之間的密度差異而導致的光吸收差異，就我們的目的而言，這就是細胞。因此，當您想在細胞中看到許多細節(jié)時，明場顯微鏡并不是很好。您如何提高分辨率？加入熒光團以染色樣品中的結(jié)構(gòu)，并過濾以照亮樣品，聚焦樣品發(fā)出的光，添加靈敏的檢測器，現(xiàn)在您可以進行熒光顯微鏡檢查了。

　　熒光成像使用的濾光片的不同類型

　　通常情況下，濾光片組被設計成可用于捕獲熒光團的更大激發(fā)和發(fā)射波長，但不會捕獲所有的熒光。多數(shù)現(xiàn)代化濾光片組的設計旨在確保激發(fā)濾光片只允許波長區(qū)間的光線通過。這種類型的濾光片稱為帶通濾光片（band-pass filter）。帶通濾光片通常通過中間波長和區(qū)間寬度確定。在較為簡單的熒光顯微鏡裝置中，一旦激發(fā)光線離開激發(fā)濾光片，即會照射到靶標上，靶標上的熒光基團隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài)，然后發(fā)射向光譜的紅外端（相對于激發(fā)光線）遷移的光線。并非所有此類發(fā)射光線都會被檢測器捕獲到——僅那些允許通過二向分色鏡且能通過發(fā)射濾光片的光線。發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或長通濾光片，具體取決于特定的熒光團和成像實驗。如果您希望讓超過特定波長的光線通過檢測器，可選擇長通濾光片.